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Proteomix HIC-ADC DARx Butyl Säulen von Sepax wurden speziell für die zuverlässige Hochdurchsatz Analytik von Antibody-Drug Konjugaten (ADC) mittels hydrophober Interaktionschromatographie (HIC) entwickelt. Die Drug-Antibody-Ratio (ADC) kann mit der Proteomix HIC-ADC DARx Butyl mit einer hohen Auflösung bestimmt werden. Außerdem ist die Säule MS kompatibel, sodass auch die Integration in den LC-MS Workflow kein Problem darstellt. Durch die kleinen Säulengrößen wird sehr wenig Probe benötigt und es können ebenfalls niedrige Konzentrationen nachgewiesen werden.
| Phase | Modifizierung | Matrix | Porengröße |
| Proteomix HIC-ADC DARx Butyl | C4 | PS/DVB mit hydrophilem Coating | nicht porös |
Die Auflösung bleibt auch bei höheren Flussraten hoch und die beobachteten DAR-Werte bleiben vergleichbar. Durch den geringen Gegendruck der Proteomix HIC-ADC DARx Butyl Säule kann diese mit Standard HPLC-Systemen bei höheren Flussraten betrieben werden.
Säule: Proteomix HIC-ADC DARx Butyl, 5µm, 100x4.6mm
Mobile Phase A: 1.5 M Ammoniumtartrat (pH 7.0)
Mobile Phase B: 25 mM Ammoniumtartrat mit 25% Isopropanol (pH 7.0)
Gradient:
| Zeit / min | %A | %B |
| 0 | 100 | 0 |
| 12 | 0 | 100 |
| 17 | 0 | 100 |
| 22 | 100 | 0 |
Flussrate: 0.3, 0.5, 0.8 mL/min
Probe: SigmaMAb Antibody-Drug Conjugate (ADC) Mimic (1 mg/mL), Injektion: 8 µg
Detektion: UV 280 nm
Temperatur: 25 °C
Durch die kurzen Säulen und die hohe Auflösung ist eine Trennung der verschiedenen DAR Komponenten in unter 3 Minuten möglich. Dies eignet sich hervorragend für die Routine High Throughput Analytik von DAR.
Säule: Proteomix HIC-ADC DARx Butyl, 5µm, 35x4.6mm
Mobile Phase A: 1.5 M Ammoniumtartrat (pH 7.0)
Mobile Phase B: 25 mM Ammoniumtartrat mit 25% Isopropanol (pH 7.0)
Gradient (3 Minuten):
| Zeit / min | %A | %B |
| 0 | 100 | 0 |
| 3 | 0 | 100 |
| 5 | 0 | 100 |
| 8 | 100 | 0 |
Gradient (2 Minuten):
| Zeit / min | %A | %B |
| 0 | 100 | 0 |
| 2 | 0 | 100 |
| 4 | 0 | 100 |
| 6.5 | 100 | 0 |
Flussrate: 1.5, 2.0 mL/min
Probe: SigmaMAb Antibody-Drug Conjugate (ADC) Mimic (1 mg/mL), Injektion: 8 µg
Detektion: UV 280 nm
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