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Die Nanofilm SEC-250 HPLC-Säule 150x7.8mm, 5µm, arbeitet mit Poren von etwa 250 Å und deckt bei nativen Proteinen 1.500 bis 1.250.000 Da ab. Sie ist die mittlere Stufe der Reihe und die Wahl für Antikörper, deren Dimere und größere Proteinkomplexe. Der Träger ist ein Kieselgel mit 5 µm Partikelgröße, belegt mit einem kovalent gebundenen, neutralen und hydrophilen Polymerfilm. Der pH-Bereich reicht von 2 bis 8,5, kurzzeitig ist pH 9 tolerierbar, für lange Standzeiten wird pH 5 bis 7,5 empfohlen. Die Salzkonzentration darf zwischen 20 mM und 2,0 M liegen, die Temperatur höchstens 80 °C betragen, wobei 10 bis 30 °C die Lebensdauer verlängern. Als Eluenten dienen wässrige Puffer wie Ammoniumacetat, Phosphat und Tris, geliefert wird die Säule in Phosphatpuffer mit Natriumazid. Als Applikationsbeispiel ist die Basislinientrennung von Rinderserumalbumin und seinem Dimer belegt, ergänzt um die Elution von Cytochrom C bei niedriger Salzkonzentration.
Nanofilm unterscheidet sich von den übrigen Größenausschlussreihen durch die Art der Oberflächenbelegung. Zenix, SRT und Unix tragen eine einlagige Beschichtung, Nanofilm trägt dagegen einen mehrlagigen polymeren Dünnfilm von wenigen Nanometern Dicke, der kovalent auf dem Kieselgel sitzt. Dieser Film deckt die Oberfläche vollständiger ab, weshalb sich der praktische Vorteil der Marke gerade bei stark positiv geladenen Proteinen zeigt. Lysozym, Cytochrom C und Aprotinin haften auf schwächer abgedeckten Trägern an freien Silanolgruppen und eluieren erst bei hoher Salzkonzentration. Auf Nanofilm gelingt das auch bei niedriger Ionenstärke, was schonendere Methoden und eine bessere Verträglichkeit mit massenspektrometrischer Kopplung erlaubt. Die Wiederfindung liegt bei den geprüften Modellproteinen über neunzig Prozent.
Nanofilm ist ein Produkt der Sepax Technologies, Inc., Newark, Delaware, USA. Sepax führt die Bezeichnungen Sepax und Nanofilm als Marken. Die genannten Produkt- und Phasenbezeichnungen gehören zum Chromatographieportfolio des Herstellers.
| Markenname | Nanofilm |
|---|---|
| Produktart | SEC / GPC Säulen |
| Länge | 150 mm |
| Innendurchmesser | 7.8 mm |
| Partikelgröße | 5 µm |
| Modifizierung (Hersteller) | SEC-250 |
| Porengröße | 250 Å |
| Herstellungsland | Vereinigte Staaten von Amerika (USA) |
| Säulentyp | Analytical Column |
| Untere Molekulargewichtsgrenze | 1.500 (Protein) |
| Obere Molekulargewichtsgrenze | 1.250.000 (Protein) |
| Hardware Material | Stainless Steel |
| Hardware Type | Ready-to-use Column |
| pH Minimum | 2.0 |
| pH Maximum | 8.5 |
| Temperatur Maximum [°C] | 80 |
| Trenntechnik | SEC / Aqueous Size Exclusion Chromatography (GFC) |
| Technologie | HPLC |
| Matrix | Silica |
| Partikelmorphologie | spherical, fully porous |