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Größenausschlusschromatographie (SEC)
Größenausschlusschromatographie (engl.: Size Exclusion Chromatography, SEC) bezeichnet ein chromatographisches Verfahren, bei dem die Analyten nach der Größe, oder genauer nach dem hydrodynamischen Radius im jeweiligen Lösungsmittel, getrennt werden. Wechselwirkungen zwischen Analyt und stationärer Phase, wie z. B. Adsorption, sind minimal und sollen keinen Einfluss auf den Trennvorgang nehmen.

Die Trennung bei der Größenausschlusschromatographie
Die größten Moleküle, welche in keine der vorhandenen Poren eindringen können, steht nur das Volumen zwischen den Teilchen der stationären Phase zur Verfügung. Dadurch werden diese kaum zurückgehalten und verlassen die Trennsäule als Erstes. Je kleiner die Moleküle sind, desto besser können sie in die Poren der stationären Phase eindringen und desto später werden sie von der Säule eluiert (Siehe Abbildung). Sind die Moleküle so klein, dass sie in alle Poren eindringen können, steht ihnen demzufolge das gesamte Volumen der mobilen Phase zur Verfügung. Dadurch verlassen diese als Letztes zusammen mit dem Lösungsmittel die Säule.
 

Welche Arten der SEC gibt es?
Werden bei der SEC wässrige mobile Phasen verwendet, so spricht man auch von der sogenannten Gel-Filtrations-Chromatographie (GFC). Diese wird oft für die Trennung von Proteinen und anderen großen Biomolekülen verwendet.
Die Gel-Permeations-Chromatographie (GPC) verwendet dagegen organische mobile Phasen und wird bevorzugt für die Trennung von unpolaren Polymeren verwendet.


Welche stationäre Phasen werden bei der SEC verwendet?
Als stationäre Phase werden entweder poröse Silica– oder Polymer-basierte Materialien verwendet. Um Adsorption oder andere unerwünschte Wechselwirkungen zwischen Analyt und stationärer Phase zu verringern sind diese noch
z. T. modifiziert oder unterliegen während des Herstellungsprozess einer speziellen Behandlung.

Sowohl für die GFC als auch für die GPC können entweder Silica– oder Polymer-basierte stationäre Phasen verwendet werden. Polymermaterialien für die GFC basieren meist auf Polymethacrylat oder Polyhydroxymethacylat. Styrol-Divinylbenzol-Copolymer (PS-DVB) wird oft für Polymer-basierte GPC-Säulen verwendet.


Anwendungen der SEC
Anwendung findet die Größenausschluss-Chromatographie u. A. bei der Trennung von Polymeren und deren Charakterisierung hinsichtlich Molekülmasse, –größe sowie –struktur. SEC kann aber auch für andere auch kleinere Moleküle verwendet werden, einzige Bedingung für eine erfolgreiche Trennung ist ein ausreichender Größenunterschied der zu trennenden Analyten.

Hersteller von Säulen für die Größenausschlusschromatographie
MZ-Analysentechnik GmbH ist seit mehr als 30 Jahren erfolgreicher Hersteller von GPC Säulen für unterschiedliche Anwendungen. Unsere stationäre Phasen MZ-Gel SDplus und MZ-Gel SDplusLS basieren beide auf Polystyrol-Divinylbenzol speziell für die anspruchsvolle und leistungsfähige GPC.
MZ-Gel SDplusLS erfüllt zusätzlich die höchsten Standards hinsichtlich Phasenbluten bei der Detektion mittels Lichtstreuung.
Für die SEC mit fluorierten Lösemitteln - wie TFE über HFIP - bieten wir unsere Säulen MZ Super-FG an. Diese basieren auf speziell modifiziertem Silica-Gel.


Weitere Hersteller von GPC-Säulen sind:

GL-Sciences™

Sepax™

Shodex™


Macherey-Nagel™

Tosoh Bioscience:

Waters™


SMT™
Inertsil® Diol, Inertsil® WP300 Diol

Mono-GPC

KF-800, KF-600, KF-400 HQ, LF, K-800, KD-800, SB-800 HQ, LB-800, HT-800, UT-800, AT-806MS, HFIP-800, HFIP-600, GF-HQ

Nucleogel® GPC

TSKgel H-type, TSKgel Alpha-type

Acquity APC™ XT, Styragel™, Ultrastyragel™, HSPgel™ HR, HSPgel™ RT, HSPgel™ HT

SMTgel™-RP


Hersteller von GFC-Säulen sind:

ES Industries™

GL-Sciences™

Mitsubishi Chem. Corp.™

Sepax™

Shodex:

Supelco™

Tosoh Bioscience™

Waters™


YMC™
Chromegapore

Inertsil® Diol, Inertsil® WP300 Diol

MCI GEL™ CQP-Series

Unix, Zenix, SRT

KW-800, KW-400, SB-800 HQ, LB-800, KS-800, GS-HQ,

Discovery® BIO GFC

TSKgel SW-type, TSKgel PW-type

Acquity APC™ AQ, Ultrahydrogel™, HSPgel™ AQ, Acquity UPLC Protein, XBrigde Protein BEH, Protein-PAK SEC

YMC-Pack Diol
Über MZ-Analysentechnik GmbH erhalten Sie Zugriff auf ein umfangreiches Sortiment an HPLC-Säulen für die Größenausschlusschromatographie (SEC). Gerne erstellen wir Ihnen ein individuelles Angebot zu Ihrer Fragestellung oder schauen Sie einfach direkt in unserem MZ-Onlineshop vorbei.

                                              

 


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