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Affinitätschromatographie
Bei der Affinitätschromatographie beruht die Trennung bzw. Reinigung einer Substanz auf einer hochspezifischen biochemischen Wechselwirkung des Analyten mit bestimmten Bindungspartnern, die auf der stationären Phase gebunden sind (ähnlich Antigen-Antikörper– oder Enzym-Inhibitor–Wechselwirkung). Dabei wird nur eine Probenkomponente im vorhandenen Substanzgemisch von der stationären Phase festgehalten, während die anderen Moleküle problemlos von der Säule gespült werden können. Am Schluss bleibt die gewünschte Probe auf dem Säulenbett zurück, welche anschließend durch Verdrängung, durch Änderung des pH-Wertes oder durch Änderung der Salzkonzentration eluiert werden kann. Die Affinitätschromatographie dient unter Anderem zur Trennung und Reinigung von Proteinen, Nucleinsäuren oder Hormonen.


Abbildung 1: Schematische Darstellung der Trennung von drei Proteinen mittels Affinitätschromatographie: Bild 1: Nur Protein-2 kann an die Liganden der stationären Phase binden. Die Proteine-1 und -3 können durch Waschen entfernt werden; Bild 2: Nach Elution der Proteine-1 und -3 verbleibt Protein-2 allein auf dem Säulenbett zurück; Bild 3: Protein-2 wird unter geeigneten Bedingungen eluiert.
Hersteller von Säulen für die Affinitätschromatographie

1.
Shodex™
Name
Base Material
Ligand Ligand Load/Gel Particle Size Column Size Application 
AFpak ADS-894
Polyhydroxymethacrylate
Dextran sulfate 30 mg 18 µm 8.0 x 50 mm  Lipoproteins,
Blood coagulation factors
AFpak AHR-894 Polyhydroxymethacrylate Heparin  5 mg 18 µm 8.0 x 50 mm  Lipoproteins,
Blood coagulation factors
AFpak APA-894 Polyhydroxymethacrylate  Protein A  4 mg 18 µm 8.0 x 50 mm  Human IgG,
Immune complexes
AFpak APG-894
Polyhydroxymethacrylate
Protein G 4–5 mg 18 µm 8.0 x 50 mm Human IgG,
Immune complexes 
AFpak AWG-894
Polyhydroxymethacrylate
Wheat germ agglutinin (WGA) 14 mg 18 µm 8.0 x 50 mm  Glycoproteins,
Polysaccharides
AFpak ACH-894 Polyhydroxymethacrylate  Choline oxydase,
Acetylcholine esterase
N/A 18 µm 8.0 x 50 mm Choline,
Acetylcholine 
2. Tosoh Bioscience™: Ist sowohl Hersteller von HPLC-Säulen als auch von Bulk-Material für die Affinitätschromatographie

a. HPLC-Säulen
Name
Base Material
Ligand Ligand Load/Gel Particle Size Column Size Application 
TSKgel Boronate-5PW
Polymethacrylate[1]
m-Aminophenylboronate N/A 10 µm 5.0 x 50 mm[2]
7.5 x 75 mm[3]
 Carbohydrates (z. B. Sorbitol), Nucleic acids, Nucleosides, Nucleotides, Catecholamines
TSKgel Chelate-5PW Polymethacrylate[1] Iminodiacetic acid  20 µmol/mL 10 µm 5.0 x 50 mm[2]
7.5 x 75 mm[3]
Immunoglobulins, Transferrin, Lectins, Milk Proteins, Membrane Proteins, Peptides
Bioassist Chelate Polymethacrylate[1]  Iminodiacetic acid 20 µmol/mL 10 µm 7.8 x 50 mm[4] Immunoglobulins, Transferrin, Lectins, Milk Proteins, Membrane Proteins, Peptides
TSKgel Tresyl-5PW
Polymethacrylate[1]
Tresyl Ca. 20 µmol/mL 10 µm 7.5 x 75 mm[3]
6.0 x 40 mm[3]
Activated packing material for synthesis of custom affinity chromatography columns
TSKgel Protein A-5PW Polymethacrylate[1]   Recombinant protein A,
Hexamer of C-Domain
 0.9-1.0 g/L  20 µm 4.6 x 35 mm[4]   Monoclonal Antibodies (mAb)
[1] 1000 Å Pore Size; [2] Glass Columns; [3] Stainless Steel Columns; [4] PEEK Column
b. Bulk Material
Name
Base Material
Ligand Package Size Application 
TOYOPEARL® AF-Chelate-650M
Polymethacrylate[1]
Iminodiacetic acid 25 mL, 100 mL,
1 L
 Immunoglobulins, Transferrin, Lectins, Milk Proteins, Membrane Proteins, Peptides
TOYOPEARL® AF-Heparin HC-650M Polymethacrylate[1] Heparin 10 mL, 100 mL,
1 L
Plasma Components, Lipoprotein Lipase, Collagenase, DNA Polymerase
TOYOPEARL® AF-Red-650ML Polymethacrylate[1]  Procion Red HE-3B (Reactive Red 120) 25 mL, 100 mL,
1 L
Nucleotide Dependent Enzymes, Lipoproteins, Plasminogen, Peptides, Hormones, Cytotoxins
TOYOPEARL® AF-rProtein A-650F[3]
Polymethacrylate[1]
Recombinant protein A,
Tetramer of modified
C-Domain
10 mL, 25 mL,
100 mL
Monoclonal Antibodies (mAb), IgG
TOYOPEARL® AF-rProtein A HC-650F[3] Polymethacrylate[1]   Recombinant protein A,
Hexamer of modified
C-Domain
10 mL, 25 mL,
100 mL
 Monoclonal Antibodies (mAb), IgG
[1] 1000 Å Pore Size, 65 µm Particle Size; [2] 1000 Å Pore Size, 45 µm Particle Size; [3] Also as ToyoScreen-Column or ToyoScreen RoboColumn available
3. Agilent™:
Name
Base Material
Ligand Ligand Load/Gel Particle Size Column Size Application 
Bio-Monolith Protein A
Poly(glycidyl methacrylate-co-ethylene dimethacrylate) highly porous monolith
Protein A N/A Monolithic 5.2 x 4.95 mm Analytical separation of all IgG (human and mouse), except for
IgG class3
4. SMT™:
Name
Base Material
Ligand Ligand Load/Gel Particle Size Column Size Application 
CIB-Protein A
Silica-Gel[1]
Protein A N/A 5 µm, 10 µm 4.6 x 50 mm
4.6 x 100 mm
IgG Proteins
CIB-IgG Silica-Gel[1] IgG N/A 5 µm, 10 µm 4.6 x 50 mm
4.6 x 100 mm
Protein A
CIB-Ovomucoid Silica-Gel[1]  Ovomucoid  N/A 5 µm 4.6 x 150 mm
4.6 x 250 mm
Purification of +/-Ketoprofen
[1] 100 Å Pore-Size
5. Bio-Rad™: ist Hersteller von Resins für die Affinitätschromatographie
Name
Base Material
Ligand Package Size Application 
Affi-Gel® Protein-A Resin
Crosslinked Agarose
Protein A 5 mL, 25 mL Purification of IgG
Affi-Prep® Protein-A Resin Polymer based Protein A 5 mL, 50 mL Purification of IgG
Affi-Gel® Blue Resin Crosslinked Agarose  Cibacron Blue F3GA dye
and DEAE
100 mL Purifies protease-free IgG from ascites, serum, and culture fluid with minimal sample preparation
CM Affi-Gel® Blue Resin
Crosslinked Agarose
Cibacron Blue F3GA dye
and CM
100 mL Produces albumin- and protease-free antibody preparation from serum without prior dialysis
Affi-Gel® Boronate Resin
Polyacrylamide
Boronate 5 g, 50 g Adsorption of cis-hydroxyl–containing molecules, including sugars, nucleotides, and glycopeptides
Affi-Prep® Polymyxin Resin Polymer based Polymyxin 25 mL Endotoxin removal
Affi-Gel® Heparin Resin  Crosslinked Agarose  Heparin 40 mL  Purification of a range of proteins 
Über MZ-Analysentechnik GmbH erhalten Sie Zugriff auf eine Vielzahl von Säulen für die Affinitätschromatographie. Gerne erstellen wir Ihnen ein individuelles Angebot zu Ihrer Fragestellung, sodass Sie Preise und Lieferzeiten der einzelnen Hersteller vergleichen können. Haben Sie Fragen oder wünschen Sie Beratung? Kontaktieren Sie uns! Wir beraten Sie gern.

                                              




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